細胞培養箱通常配備有加熱和制冷系統。加熱系統能夠將箱內溫度升高并維持在一個適宜細胞生長的范圍內,一般恒定在37°C左右;而制冷系統則可在需要時降低溫度或輔助調節,確保溫度的穩定性。培養箱還采用六面直熱系統,使加熱均勻迅速,溫度恢復快,且溫度均勻性高、波動度小。
為了防止培養液蒸發,保持細胞所處的濕潤環境,培養箱會通過特定的裝置來維持較高的濕度水平,大約為95。橫向雙循環風道設計有助于保證溫濕度的均一性。對于二氧化碳培養箱而言,它能準確地調控箱體內的CO濃度。這是因為合適的CO濃度可以維持細胞培養液的pH值穩定在7.2–7.4之間,這是細胞正常生長所需的條件之一。同時,配合進口傳感器實現自動補償,進一步提高了控制的精度。
細胞培養箱的使用步驟:
1.準備工作
-清潔與消毒:在使用前,需對培養箱內部及放置樣品的區域進行清潔和消毒,以防止微生物污染影響細胞培養效果。可以使用75酒精擦拭內壁、擱板等部位。
-檢查設備狀態:查看培養箱的各項指示燈是否正常亮起,確認電源連接穩定且無故障提示。同時,檢查門封條是否完好,確保密封性良好,避免外界空氣過度進入干擾箱內環境。
2.參數設置
-溫度設定:依據所培養細胞的類型和實驗要求,在溫控面板上準確地設置合適的溫度值。不同類型的細胞有不同的生長溫度范圍,如哺乳動物細胞通常在37℃左右。
-濕度調節:按照實驗需求調整濕度水平。一般來說,大多數細胞培養需要相對較高的濕度環境,以保持培養基的水分平衡,防止干燥對細胞造成損害。通過加水或排水等方式來實現目標濕度。
-CO2濃度控制:對于需要特定二氧化碳水平的細胞培養體系,準確設置CO2濃度。CO2不僅影響著培養液的pH值,還參與細胞的一些生理過程。可通過內置的CO2傳感器和控制系統來進行準確調控。
3.預平衡驗證:參數設置完成后,不要立即放入樣品,應讓培養箱先運行一段時間,使箱內的實際溫度、濕度和CO2濃度達到并穩定在設定值附近。這一過程稱為預平衡,一般需要數小時甚至更長時間,具體取決于設備的性能和環境條件。期間可使用專業的監測儀器定期檢測箱內的參數變化,直至確認各項指標均已穩定且符合要求。
4.放入樣品:當培養箱內的環境參數穩定后,將處理好的細胞樣本小心地放入培養箱內的合適位置。注意不要過于密集地擺放樣品,以保證空氣流通均勻,每個樣品都能充分接觸到適宜的培養條件。如果是多層擱板的培養箱,盡量平均分配樣品到各層。
5.實時監測與記錄:在細胞培養過程中,持續關注培養箱的工作狀態和參數變化。許多現代培養箱配備了數據記錄功能,可以自動保存歷史數據;也可以手動定時記錄關鍵參數,以便后續分析和追溯。若發現異常情況,如溫度波動過大、濕度偏離設定范圍等,應及時采取措施進行調整或排查原因。